外觀(guān)：	灰白色無(wú)定形粉末
比活性：	≥150U/mg
穩定性：	-20℃至少穩定一年
分子量：	大約55KD
等電點(diǎn)：	4.8
米氏常數：	1.09x10^-4M（G-6-P），1.4x10^-4M（NAD⁺）
抑制劑：	不受疊氮鈉的抑制
pH穩定性：	5.0～10.5 （Fig.4-1）
最適pH：	8.5 （Fig.4-2）
最適溫度：	55℃以上（Fig.4-3）
熱穩定性：	50℃以下穩定（Fig.4-4）

二、 酶活測定方法

1、 原理：

2、酶活定義：

1個(gè)酶活單位等于在以下反應條件下1分鐘內轉化1微摩爾NAD形成NADH所需要的酶量。

3. 檢測方法

3.1 樣品稀釋液的配制

配制0.05M，pH7.5的Tris-HCl緩沖液，緩沖液中添加0.1%牛血清白蛋白。

3.2 酶活檢測試劑配制方法

試劑A：配制0.05M，pH7.8的Tris-HCl緩沖液，緩沖液液中添加含0.0033M的氯化鎂。

試劑B：配制濃度為60mM 的NAD⁺溶液 (現用現配)。

試劑C：配制0.1M的葡萄糖-6-磷酸溶液（現用現配）

3.3待測樣品的配制

檢測前用臥氏稱(chēng)量管稱(chēng)量所需酶，酶稱(chēng)量時(shí)，應至少稱(chēng)量10mg的酶，以保證稱(chēng)量的準確性。用酶稀釋液溶解，定容到配制體積。根據理論酶活，用樣品稀釋液將樣品儲備液稀釋至50-200 U/L

3.4 酶活檢測步驟

測定前將試劑放入冰水浴中，降溫到30度以下。

按比例依次加入以下試劑：2.7ml的試劑A、0.1ml的試劑B、0.1ml的試劑C，30℃預熱300秒，加待測酶液0.1ml（空白對照取0.1毫升酶稀釋液），在340nm測定加樣后4-5分鐘之間的吸光度變化率。此法酶的線(xiàn)性為60-200U/L，檢測時(shí)用該濃度區段的標本進(jìn)行檢測。

3.5 酶活力計算公式

酶活力（U/L）= △A/min×Vt× D×1000 =△A/min×4820×D

6.22×Vs×d

Vt	：反應液總體積（ml）
ε	：NADH摩爾吸光系數 6.22 （cm²/micromole）
Vs	：待測酶液的體積（ml）
d	：比色杯光徑 (cm)
D	：稀釋倍數
△A/min	：△A/min_{（待檢樣品）} －△A/min_（空白）（單位：ABS/min）

三. 附圖

未找到相應參數組，請于后臺屬性模板中添加

暫未實(shí)現,敬請期待

關(guān)鍵詞

胱硫醚-β-裂解酶

IVD原料